997755.com-首页

科技研发

犊牛前胸腺素α基因克隆与表达

时间:2007-12-21 11:28:48  来源:  编辑:
    在人类疾病治疗中,本产品可用于系统性红斑狼疮、乙型、丙型肝炎、非典型肺炎等病毒性疾病、免疫缺陷病、癌症、男女不育、艾滋病、心血管和神经疾病的治疗。该药物还可用于某些动物疾病的治疗,如鸡传染性贫血、腺病毒病、禽流感、传染性法式囊病、大肠杆菌病、沙门氏菌病等。
    目前,国内外主要采用动物组织,如从动物胸腺提取方法制备胸腺素。此外,也有采用生物合成法生产胸腺素α1的报道。市场所售的胸腺素成本高、产量低、价格昂贵。本技术是利用基因工程法生产胸腺素的一种创新技术,即,将犊牛前胸腺素基因克隆到细菌的基因组中,通过重组工程菌的发酵液来生产前胸腺素α,生产工艺主要涉及细菌发酵,蛋白提取纯化等,工艺路线简单,可以工业化生产。生产成本大幅降低。
    课题组先后开展了“犊牛前胸腺素-α(ProT-α)基因mRNA的克隆和鉴定”、真核和原核基因重组工程菌等研究工作,取得了如下结果:
   (1)完成“犊牛前胸腺素-α基因mRNA的克隆和鉴定”,获得了犊牛ProT-αmRNA基因的cDNA片段,其由1039个核苷酸(nt)组成,前胸腺素α编码框长330nt,编码109个氨基酸残基的多肽。
   (2)完成“真核表达载体和重组工程菌的构建和鉴定”,获得犊牛前胸腺素-α基因重组酵母菌株,摇瓶表达量达到30mg•L-1。
   (3)完成“原核表达载体和重组工程菌的构建和鉴定”,获得大肠杆菌重组工程菌,表达产物“GST-ProT-α融合蛋白”分子量约为38KD,ProT-α约为12KD。产物纯度达到96%以上。摇瓶表达量约为161mg•L-1。
   (4)开展了“GST-ProT-对小鼠NK细胞活性的影响”和“GST-ProT-α融合蛋白对小鼠脾细胞增殖的影响”两项生物活性测定试验,试验结果表明GST-ProT-α融合蛋白不论对小鼠NK细胞还是脾细胞都有明显的刺激作用。与意大利进口的人工合成产品(日达仙)比较,它们具有近似相同的生物活性:即,16ug•ml-1以上浓度的ProT-α可显著增加NK细胞的杀伤活性,且杀伤活性随剂量的增加而呈上升趋势。申请国家发明专利一项,专利申请号:200410035736.9。
    该项目于2005年12月通过山东省科技厅组织的科技成果鉴定,达到国际先进水平。
顶一下
返回首页
返回首页
上一篇: 间苯三酚系列酰基衍生物的合成和筛选
下一篇: 布拉酵母菌微囊及部分作用机制研究

站内信息搜索

997755.com? 版权所有 地址:山东省济南市历城区彩石镇经十东路28789号 997755.com | 联系大家

997755.com|997755.com

XML 地图 | Sitemap 地图